卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD?Bioscience）多年来致力于抗体制备研究。我们拥有经验丰富的抗体制备团队，积累了成熟的技术经验，具有齐全的抗体生产设备，能够为客户提供优质的重组单克隆抗体制备服务，包括兔源，鼠源，驼源，羊源，鸡源等。
与小鼠单抗相比，兔单抗具有亲和力高、识别的抗原表位更丰富等优点，广泛应用于科研，诊断和治疗。兔单克隆抗体的亲和力KD通常处于皮摩尔水平，而大多数小鼠单克隆抗体的KD处于纳摩尔或亚纳摩尔水平，兔单克隆抗体的亲和力是小鼠的100倍；兔的免疫系统能够识别细微的抗原表位差异，产生高特异性针对于该抗原表位的单克隆抗体，并且具有更广的抗原表位识别。
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单B细胞单抗制备优势：
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类目 |
单B细胞技术 |
杂交瘤技术 |
噬菌体展示技术 |
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抗体 |
天然 |
天然 |
非天然 |
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抗体亲和力 |
高 |
高 |
中等 |
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可成药性 |
高 |
高 |
低 |
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时间 |
16～20周，可选快速免疫 |
20～26周，可选快速免疫 |
16～20周，可选快速免疫 |
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抗体基因序列 |
直接获得 |
需要进一步测序 |
直接获得 |
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抗体多样性 |
高 |
中等 |
中等 |
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所能筛选的种属 |
不限种属 |
鼠、兔 |
不限种属 |
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兔单B细胞技术抗体制备：
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卡梅德生物单B细胞单抗制备基于流式细胞分选技术，利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性，直接从单个B细胞中扩增出抗体基因，通过重组表达获得特异性抗体。基于单B细胞技术，可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列，得到的兔单克隆抗体具有高特异性、高活性和高亲和力等突出优势。为了满足客户的不同需求，卡梅德生物能够提供从抗原设计，合成与修饰，到动物免疫，单B细胞富集筛选，表达与纯化，功能验证等一站式技术服务。
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制备流程：
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服务内容：
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服务内容 |
交付材料 |
周期 |
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动物免疫
PBMC分离 |
免疫兔子4-5次 ELISA效价测定 外周血采集
PBMC分离 |
ELISA检测结果 标准实验记录
PBMC，1×106?cells*10支 |
4-10周
可选择标准免疫或快速免疫 |
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流式分选 |
PBMC流式分选 |
标准实验结果记录 |
1-2个工作日 |
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单B细胞
培养筛选 |
5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选 |
阳性克隆筛选结果
标准实验记录 |
2~3周 |
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阳性克隆测序 |
至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序 |
RT-PCR结果 测序原始数据 特异性序列
标准实验记录 |
1周 |
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载体构建
抗体表达纯化 |
哺乳表达载体构建 细胞转染
ELISA验证 |
至少3个阳性克隆序列 表达载体 纯化抗体500ug/个阳性克隆 ELISA检测结果
标准实验报告 |
5~6周
可选其他增值验证方法 |
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样品要求：
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客户提供 |
要求 |
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重组蛋白 |
* ≥2.5 mg，要求蛋白纯度>85%，蛋白要求分子量大于10 kDa，可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化，需额外提供10 mg左右重组蛋白 |
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多肽与小分子 |
* 裸肽≥10 mg，多肽纯度>90%，不少于10个AA，偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白；小分子需要预先对结构进行评估 |
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服务优势：
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-- 周期短
-- 不限种属
-- 可获得抗体序列
-- 得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
-- 丰富的经验积累
-- 严格的质控体系
-- 服务可定制：提供个性化定制服务满足客户的实际需求
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如何订购？
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参考文献：
(1) Gross A, Schoendube J, Zimmermann S, et al. Technologies for Single-Cell Isolation. Int J Mol Sci. 2015;16(8):16897-16919.
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